Методы генетической инженерии. Генетика бактерий

Description

Практическое руководство. — М.: Мир, 1984. — 176 c.: ил.Книга представляет собой практическое руководство по генетической инженерии бактерий, написанное американскими авторами. Подробно изложены методы экспериментов с мигрирующими генетическими элементами, методы конструирования гибридных молекул ДНК, техника работы с фаговыми, плазмидными и бактериальными ДНК. Справочный раздел содержит сведения о наиболее употребляемых средах для культивирования бактерий, условиях хранения штаммов бактерий и препаратов ДНК, ферментах рестрикции, физических картах плазмидиых и фаговых векторов и т.д. Предназначена для молекулярных биологов, биохимиков, генетиков, микробиологов, вирусологов.СодержаниеЭкспериментыВыделение вставок Tn10, приводящих к ауксотрофности Выделение вставок Tn10 вблизи определенных геновДелеции, вызванные элементом Tn10Локализованный мутагенез Выделение и характеристика точковых мутантов фага λ, полученных с помощью гидроксиламинаВыделение делеционных мутантов λampКартирование делецийОтбор клонов λgt-his по комплементацииГибридизация бляшекГибридизация из геля (блот-гибридизация)Электронная микроскопия ДНКСубклонироваиие из фага λ в плазмидиом вектореВстраивание F’tslас+, направляемое Tn10 МетодикиОчистка фага методом бляшекПолучение препаратов фагаБыстрый метод получения трансдуцирующего фага P22Очистка фагаТранспозиция элемента Tn10Отбор мутантов Tets среди штаммов, несущих элемент Tn10Выделение фага λ с функционирующим геном β-лактамазы на чашках RedИндукция мутаций гидроксиламиномОтбор делеционных мутантов фага λТесты на рекомбинацию и комплементацию фага in vivoВыделение ДНК из фага λВыделение плазмидной и бактериальной ДНКУдаление бромистого этидия из ДНК, находящейся в растворе CsClОбразование гибридных фагов λgtУпаковка ДНК фага λ в вирусные частицы in vitroТрансфекция ДНК фага λСубклонирование фрагментов ДНК в векторах-плазмидах E. coliТрансформация плазмидной ДНКСпособность гибридного фага к комплементации в клетках E. coliЭлектрофорез в агарозном гелеПеренос ДНК на нитроцеллюлозу или диазотированную бумагуВнесение метки α-32P в ДНК с помощью ник-трансляцииГибридизация с иммобилизованной ДНК или РНК на твёрдом носителеРадиоавтография 32P, связавшегося с фильтромВыделение ДНК из агарозного геляБыстрая оценка концентрации ДНК с использованием бромистого этидияЭлектронная микроскопия ДНКОбычная методика образования гетеродуплексовВыделение ферментных препаратов из клеток, лизогенных по фагу λcI857 Sam7ПриложенияСреды, концентрации лекарственных препаратов, пищевые добавкиДиагностика ауксотрофов (ауксанография)Хранение бактерий, фагов и ДНКБуферы и растворыПодготовка трубок для диализаИзмерение объемов, единицыРасщепление рестриктирующими эндонуклеазамиЕмкость векторов, образуемых на основе фага λРестрикционные картыКарта делеций в гистидиновом оперонеШаблоныИзображение с текстовым слоем.