Методы иммунного анализа

Description

В учебном пособии изложены теоретические основы методов иммунного анализа, дается описание применяемых научных и технологических реше-ний. Для каждого из представленных методов указана область применения, описаны преимущества и недостатки, технологические ограничения, а также возможные пути их преодоления. В пособии приводятся задания различного уровня сложности, направленные как на закрепление тео-ретического материала, так и на развитие научного мышления. Учебное пособие предназначено для самостоятельной работы студентов и аспирантов вузов медицинского, биологического и ветеринарного профиля. Список сокращений Предисловие Глава 1. Основные понятия 1.1. Антигены 1.1.1. Антигенная детерминанта 1.1.2. Полные и неполные антигены 1.1.3. Антигены клеток 1.2. Антитела 1.2.1. Представления об иммуноглобулиновом мономере 1.2.2. Расщепление молекул антител некоторыми ферментами (материал для дополнительного изучения) 1.2.3. Многообразие антител 1.2.4. Клональность антител 1.2.5. Полные антитела 1.2.6. Неполные антитела 1.2.7. Меченые (конъюгированные) антитела 1.2.8. Аффинность и авидность антител 1.2.9. Клиническое значение определения авидности антител (материал для дополнительного изучения) 1.3. Иммунные комплексы 1.4. Иммунологический перекрест 1.5. Типичные приемы и технологические решения, связанные с использованием антител. Возможности их применения, преимущества и недостатки Глава 2. Индикация протекания иммунных реакций 2.1. Оценка изменений физико-химических свойств растворов для определения признаков произошедшей иммунной реакции 2.2. Использование явления агглютинации для оценки результатов иммунных реакций 2.3. Использование явления лизиса клеток для оценки результатов иммунных реакций 2.4. Использование меченых антигенов 2.5. Использование меченых (конъюгированных) антител 2.5.1. Использование антител, конъюгированных с флуоресцирующими метками 2.5.2. Использование антител, конъюгированных с ферментными метками 2.5.3. Использование антител, конъюгированных с электронноконтрастными метками 2.5.4. Использование антител, конъюгированных с радиоизотопными метками 2.5.5. Использование биолюминесценции и хемолюминесценции для оценки результатов иммунных реакций (материал для дополнительного изучения) Глава 3. Методы определения растворимых молекул антигенов и антител в жидкой фазе 3.1. Реакция преципитации 3.2. Реакции агглютинации 3.3. Реакция непрямой гемагглютинации (РНГА) 3.4. Реакция торможения гемагглютинации (РТГА) 3.5. Прямая проба Кумбса (материал для дополнительного изучения) 3.6. Непрямая проба Кумбса (материал для дополнительного изучения) 3.7. Гемагглютининовая проба для обнаружения холодовых антител (материал для дополнительного изучения) 3.8. Реакция связывания комплемента (РСК) 3.9. Реакция агглютинации латексных частиц (материал для дополнительного изучения) 3.10. Реакции агглютинации бактериальных клеток Глава 4. Гелевые методы 4.1. Некоторые сведения о строении гелей и их использовании 4.2. Простая радиальная иммуннодиффузия (РИД, тест Манчини) 4.3. Двойная радиальная иммунодиффузия (метод Ухтерлони) (материал для дополнительного изучения) 4.4. Электроиммунодиффузия (противоточный электрофорез) 4.5. Иммуноэлектрофорез (материал для дополнительного изучения) 4.6. Ракетный электрофорез (иммуноэлектрофорез в геле, содержащем антитела) Глава 5. Твердофазные методы определения молекул антигенов и антител 5.1. Некоторые общие сведения о методах иммуноферментного анализа 5.2. Классический ИФА 5.3. Определение индекса авидности антител в ИФА (материал для дополнительного изучения) 5.4. «Сэндвич»-ИФА 5.5. Конкурентный ИФА (материал для дополнительного изучения) 5.6. ИФА с C1q (материал для дополнительного изучения) 5.7. Электрофорез-ассистированные варианты ИФА (материал для дополнительного изучения) 5.8. Dot-ИФА (материал для дополнительного изучения) 5.9. ИФА на иммунологических биочипах (материал для дополнительного изучения) 5.10. Иммуноферментный спот-анализ (ELISPOT) (материал для дополнительного изучения) 5.10.1. Определение антигенспецифичных Т-клеток методом ELISPOT 5.10.2. Определение антигенспецифичных В-клеток методом ELISPOT 5.11. Радиоиммунный анализ (материал для дополнительного изучения) 5.12. Реакция иммунофлуоресценции (РИФ) 5.12.1. Прямая РИФ 5.12.2. Непрямая РИФ 5.13. Иммунохроматография (материал для дополнительного изучения) 5.14. Иммуноблотинг («вестерн-блот») (материал для дополнительного изучения) Глава 6. Методы определения антигенов клеток с использованием неконъюгированных антител 6.1. Реакция розеткообразования 6.2. Реакция иммунного лизиса 6.3. Пэннинг 6.4. Фракционирование клеток с помощью иммуномагнитных микробус 6.5. Анализ с использованием иммунологических биочипов (материал для дополнительного изучения) Глава 7. Методы определения антигенов клеток с использованием конъюгированных антител 7.1. Общие сведения о иммуногистохимических и иммуноцитохимических методах 7.2. Иммуноферментные ИГХ- и ИЦХ-методы 7.2.1. Прямой метод 7.2.2. Двойной непрямой метод 7.2.3. Окрашивание в системе «биотин-авидин/пероксидаза» (материал для дополнительного изучения) 7.2.4. EnVision-метод (материал для дополнительного изучения) 7.3. Иммунофлуоресцентные ИГХ- и ИЦХ-методы 7.4. Тканевые биочипы (материал для дополнительного изучения) 7.5. Проточная цитометрия 7.6. TSA-метод (материал для дополнительного изучения) 7.7. Радиоиммунные методы исследования клеток (материал для дополнительного изучения) 7.8. Методы электронномикроскопической иммуноцитохимии (материал для дополнительного изучения) Тестовые задания Задачи Задачи повышенной сложности Заключение Библиографический список